EISSN 2687-1270
Языки: ru · en

Статья: Применение метода атомно-силовой микроскопии для исследования ответов механочувствительных каналов Piezo1 фибробластов сердца (2024)

Читать онлайн

Установлено, что Jedi2, активатор механочувствительных каналов Piezo1, влияет на рост эксплантатов сердца эмбриональной ткани. Зависимость изменения индекса площади от концентрации действующего агента описывается уравнением Хилла (Кd ≈ 20 мкМ, коэффициент Хилла — 1,6). Концентрация Jedi2, равная 10 мкМ, была выбрана для химической активации механочувствительных каналов Piezo1 в исследовании с помощью метода атомно-силовой микроскопии, поскольку она не влияла на рост эксплантатов сердца. На основании полученной зависимости стимул–ответ для механического воздействия со стороны зонда атомно-силового микроскопа при исследовании влияния Jedi2 на фибробласты была выбрана сила 3 нН, не приводящая к изменению жесткости клеток в ответ на механическую стимуляцию. В отличие от малых сил (1–5 нН), при больших силах стимуляции (6–7 нН) наблюдалось резкое увеличение модуля Юнга фибробластов. Исследование с помощью атомно-силовой микроскопии показало, что Jedi2 вызывает увеличение жесткости фибробластов — модуль Юнга клеток после воздействия исследуемого вещества (68 ± 7 кПа, n = 33) растет по сравнению с контролем (37 ± 4 кПа, n = 29). Эффект воздействия Jedi2 усиливается со временем: в рамках рассмотренного периода максимальное влияние на механические характеристики фибробластов достигается спустя более двух часов воздействия вещества. Мы предполагаем, что наблюдаемый при воздействии Jedi2 и силе стимуляции 3 нН рост жесткости фибробластов связан с вызванным модуляцией работы каналов Piezo1 сдвигом порога запуска ответа клеток в сторону меньших сил.

Jedi2, an activator of mechanosensitive Piezo1 channels, was found to affect the growth of embryonic heart tissue explants. The dependence of the change in the area index on the Jedi2 concentration is described by the Hill equation (Kd ≈ 20 μM, Hill coefficient — 1.6). A concentration of 10 μM was chosen to chemically activate mechanosensitive Piezo1 channels in the atomic force microscopy (AFM) study since it did not impact the growth of heart explants. Based on the obtained stimulus–response relationship, a force of 3 nN was chosen for mechanical action from the AFM probe when studying the effect of Jedi2 on fibroblasts, which does not lead to a change in cell stiffness in response to mechanical stimulation. In contrast to low forces (1–5 nN), high stimulation forces (6–7 nN) were associated with a sharp increase in the Young’s modulus of fibroblasts. An AFM study showed that Jedi2 augments fibroblast stiffness: the Young’s modulus of cells after exposure to the test substance (68 ± 7 kPa, n = 33) increases compared to the control (37 ± 4 kPa, n = 29). The effect of Jedi2 becomes stronger with time, with the maximum effect on fibroblast mechanical characteristics achieved after more than two hours of exposure to the substance. We assume that the increase in fibroblast stiffness observed under the influence of Jedi2 and at a stimulation force of 3 nN is associated with a shift in the threshold for triggering the cell response towards lower forces caused by the modulation of the Piezo1 channels.

Ключевые фразы: фибробласты, органотипическая культура ткани, каналы piezo1, jedi2, атомно-силовая микроскопия
Автор (ы): Халисов Максим Миндигалеевич
Соавтор (ы): Беринцева Анна Владиславовна, Подзорова Светлана Александровна, Крылов Борис Владимирович, Пеннияйнен Валентина Альбертовна
Журнал: ИНТЕГРАТИВНАЯ ФИЗИОЛОГИЯ

Идентификаторы и классификаторы

УДК
576.32/.36. Физиология, биохимия, биофизика и молекулярная биология клетки
577.29. Другие вопросы, связанные с исследованием биологических систем на молекулярном уровне
57.085.23. на культурах ткани, на культурах клеток
Для цитирования:
ХАЛИСОВ М. М., БЕРИНЦЕВА А. В., ПОДЗОРОВА С. А., КРЫЛОВ Б. В., ПЕННИЯЙНЕН В. А. ПРИМЕНЕНИЕ МЕТОДА АТОМНО-СИЛОВОЙ МИКРОСКОПИИ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ ОТВЕТОВ МЕХАНОЧУВСТВИТЕЛЬНЫХ КАНАЛОВ PIEZO1 ФИБРОБЛАСТОВ СЕРДЦА // ИНТЕГРАТИВНАЯ ФИЗИОЛОГИЯ. 2024. Т. 5 № 1
Текстовый фрагмент статьи